作者：司春祥 陈伯华 吕振华基因faslrna互补椎间盘原位杂交
摘要：目的观察凋亡相关基因FasL mRNA在椎间盘细胞中表达的分布。方法收集胎儿及成人病理腰椎间盘髓核标本，PHA—P激活单个核细胞诱导FasL表达，提取总RNA，RT-PCR制备FasL基因片段。定向克隆人质粒载体pSPT19多克隆位点构建重组质粒，体外转录制备Dig-FasL cRNA探针。cRNA探针原位杂交进行FasL mRNA表达分布的观察。结果克隆化FasL序列经DNA测序准确无误，体外转录cRNA探针标记效果满意；胎儿腰椎间盘组织脊索细胞、软骨样细胞中可检测到FasLmRNA的较高杂交信号，成人突出椎间盘细胞中罕见正常细胞，未检出FasL mRNA信号。结论FasL基因在胎儿期腰椎间盘细胞内表达，细胞凋亡发生早。成年时期，细胞数急剧减少，代谢功能低下，无法检出凋亡基因表达。
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