作者：冯艺 王笑峰 王云 罗兵潜伏膜蛋白1rna干扰小干涉rna细胞凋亡
摘要：目的探讨化学合成小于涉RNA（siRNA）对Epstein—Barr病毒（EBV）潜伏膜蛋白l（LMP1）阳性胃上皮（GT38）细胞LMP1编码基因表达的抑制作用，以及对细胞增殖和凋亡的影响。方法化学合成靶向LMP1 mRNA不同位点的3对siRNA，分别转染GT38细胞，选择干扰效果最佳的siRNA进行实验研究，行RTPCR、Hoehest33258荧光染色及流式细胞术分析。结果RT—PCR结果显示，3对靶向LMP1的siRNA均能抑制GT38细胞LMP1的转录表达，以靶向LMP1 mRNA649位点的siRNA作用效果最强。Hochest 33258荧光染色可见siRNA649作用后的GT38细胞发生凋亡。流式细胞分析显示，siRNA649作用24、72以及120h后的细胞其细胞周期无明显改变。RT—PCR检测结果表明，转染siRNA649的靶细胞Bcl-2的表达水平降低。结论靶向LMP1的特异性siRNA可以有效抑制LMP1的转录表达，进而可能通过抑制Bcl-2的表达诱导靶细胞凋亡。GT38细胞系可作为研究LMP1生物活性及其在EBV相关肿瘤发生中所起作用的理想的靶细胞。
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