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RNA干扰EGFR基因对卵巢癌细胞化疗敏感性的影响

作者:杜鹃 陈爱平 宋旭霞 刘晖卵巢肿瘤受体表皮生长因子rna干扰顺铂

摘要:目的构建表皮生长因子受体(EGFR)基因的小干扰RNA(siRNA)质粒,转染人卵巢癌细胞株sk-ov3后检测RNA干扰(RNAi)对EGFR基因表达及细胞对化疗药物敏感性的影响。方法体外构建EGFR小发卡状RNA(shRNA)的表达质粒,脂质体法介导将其转染入skov3细胞。实验分为正常对照组、非特异性转染组和特异性转染组。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测EGFR mRNA的表达,使用免疫细胞化学法(ICC)检测EGFR蛋白的表达。使用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定EGFR shRNA转染skov3细胞后细胞对顺铂敏感性的改变。结果EGFR shRNA转染组细胞EGFR mRNA的表达与其他两组相比明显减弱(F=87.73,q=16.81、15.33,P〈0.01),EGFR蛋白表达明显下调(F=69.29,q=14.71、13.57,P〈0.01);顺铂敏感性比正常对照组提高了约3倍。结论靶向EGFR基因的序列特异性shRNA可有效抑制skov3细胞中EGFR基因的表达,增强skov3细胞对顺铂的敏感性。

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