作者:杨堃; 刘相萍; 隋爱华; 吴力群; 吕振华骨形态发生蛋白质类重组真核表达载体逆转录聚合酶链反应
摘要:目的获得骨形态发生蛋白(BMP-9)基因并进行基因读码框架的克隆。方法自正常成人肝组织提取总RNA,一步法RT-PCR扩增BMP-9,扩增产物经过胶回收及酶切后,克隆入高效真核表达质粒pcDNA4/HisMax,构建重组表达载体。结果RT-PCR扩增获得约1.3kb大小的产物,经限制性酶切分析和DNA测序,证实为人BMP-9基因的完整开放读码框架。重组载体表达读码序列正确。结论正常成人肝组织总RNA经一步法RT-PCR,能够对BMP-9基因的开放读码框架进行完整有效的筛选。BMP-9开放读码框架的完整克隆为其在骨、内分泌和神经系统等多能作用的转基因实验研究提供了基础。
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