作者：叶理; 吕成志; 靳亚丽; 王会翔; 张振国; ...麻风分枝杆菌聚合酶链反应实时定量聚合酶链反应
摘要：目的：研建一种适用于临床中检测麻风杆菌（ML）的分子生物学方法,并优化检测条件以提高检测方法的灵敏度。方法：用麻风杆菌纯DNA作模板,对PCR反应体系中模板浓度、引物浓度等反应条件进行优化,以建立高敏感性的PCR反应体系,并与实时荧光定量PCR（Real-time PCR）方法比较,对麻风病人标本进行检测,确定优化后两法的反应体系及两法的临床检测意义。结果：经过大量的实验比对表明,反应体系引物含量为0.2μL×100μmol时,模板浓度10-1条ML/m L可以作为稳定的可检测到条带的模板浓度的下限。对52例各型麻风患者标本的检测结果显示常规PCR检测阳性数（49/52）略高于Real-time PCR（47/52）,但Real-time PCR操作程序简单和需时短,且成本低。结论：通过对PCR反应条件中DNA模板浓度和引物浓度的优选,提高了PCR检测麻风杆菌DNA的灵敏度;对于不同PCR方法的选择方面,Real-time PCR比常规PCR简捷快速,而常规PCR灵敏度略高于Realtime PCR。
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