作者:李建军; 郑锦芬; 江智茂; 张芳婷; 钟绮丽...皮肤黑素细胞细胞培养
摘要:目的:建立不含佛波醇酯(TPA)和霍乱毒素(CT)培养液培养人类正常表皮黑素细胞的方法,避免TPA的致瘤危险和霍乱毒素的毒性。方法:临床环切包皮经中性酶-胰酶(Dispase Ⅱ—Trypsin)两步消化后,获得表皮基底细胞悬液,于不含TPA和CT的KC—SFM角质形成细胞无血清培养基培养,用差速贴壁法及胰酶差速消化法去除角质形成细胞,用两段法去除成纤维细胞污染,观察黑素细胞的增殖情况和树突伸展状态,采用多巴(Dopa)染色和免疫组化对黑素细胞进行鉴定。结果:经过7天的培养,黑素细胞达到70%汇合,细胞呈双极、三极或多极的树突状。经1—2次传代,黑素细胞纯度达98%以上,Dopa染色和抗S-100单抗染色阳性。结论:用不含TPA和CT的KC—SFM角质形成细胞培养基可以获得大量高纯度黑色素细胞。
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