作者：丁爱琴; 李绍翠; 刘庆超; 王奎玲; 刘庆华...切花月季rhmyb96表达特性转录活性
摘要：月季(Rosa hybrida)种质遗传品性受外界环境条件和基因调控的影响,转录调控在其中发挥重要作用。为了研究月季R2R3-MYB (v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog)类转录因子的生物学功能,利用转录组测序获得的序列信息,结合c DNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术,从切花月季‘萨蔓莎’中分离得到1个新的MYB类型的转录因子基因,命名为RhMYB96(GenBank No. MF185658)。该基因ORF包含1 065 bp,编码354个氨基酸;蛋白质分子量为39.49 kD,等电点为6.89,分子式为C1693H2655N519O548S14。蛋白序列多重比对发现,RhMYB96在N端具有保守的R2-MYB和R3-MYB结构域,为典型的螺旋-转角-螺旋结构;构建RhMYB96与不同植物R2R3-MYB蛋白C端氨基酸序列的系统发育树,结果表明,Rh MYB96与拟南芥(Arabidopis thaliana) AtMYB96、AtMYB94和AtMYB30聚为一类,属于S1亚组R2R3-MYB类型转录因子。利用qRT-PCR技术分析RhMYB96的表达模式,结果显示,月季RhMYB96在花瓣中的表达量最高;12 h盐胁迫和脱落酸(abscisic acid, ABA)处理可诱导RhMYB96表达,盐胁迫下施加ABA也能诱导RhMYB96表达。构建包含RhMYB96全长等6个不同长度片段的酵母(Yeast)表达载体,利用酵母单杂交技术分析了RhMYB96的转录激活活性,结果显示,RhMYB96是转录激活子,N端没有自激活性,C端具有明显的自激活性。上述结果表明,转录激活子RhMYB96可能通过ABA依赖途径参与盐胁迫应答。本研究为月季RhMYB96转录调控机制研究提供了基础资料,也为月季的分子育种研究提供了理论参考。
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