作者：林莉; 邵恩斯; 陈雪琳; 张娇; 黄天培; 关...褐飞虱sf9免疫荧光定位
摘要：褐飞虱（Nilaparvata lugens）是中国水稻（Oryza sativa）生产中对水稻危害极为严重的农业害虫之一。随着微生物杀虫剂苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringsis, Bt）的使用及转Bt杀虫基因作物的推广，对Bt不敏感的褐飞虱的防治将成为难点。当前研究表明Cry毒素与靶标昆虫中肠膜结合氨肽酶N（aminopeptidase N, APN）的结合是Bt Cry毒素毒理机制中的重要步骤。本研究对褐飞虱转录组数据中获得的一个褐飞虱中肠apn基因进行全长克隆，构建Bacmid-bphAPN重组杆状病毒载体，并在草地贪夜蛾（Spodoptera frugiperda）卵巢细胞（Sf9）中表达。经Western blot、蛋白质谱及免疫荧光定位检测证实bphAPN蛋白成功表达。细胞毒性实验结果显示表达了褐飞虱中肠APN的Sf9细胞对Cry1Ac活化蛋白不敏感。褐飞虱中肠APN的体外真核表达有助于褐飞虱中肠APN的特征分析，为开发对褐飞虱有毒性作用的新型Cry毒素提供了资料基础。
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