作者：叶超楠; 沈栎阳; 方春; 曹跃芬; 於金生水稻mir396高温胁迫表达分析
摘要：miRNA是真核生物体内一类非编码的小RNA，在动植物发育过程中发挥重要作用，但迄今为止，其在水稻耐高温方面的分子机理研究很少。为进行水稻（Oryza sativa）高温胁迫下miRNA的功能研究，前期通过小RNA测序发现，miR396家族是响应水稻高温胁迫最显著的家族。为了进一步研究miR396家族响应高温胁迫的分子机制，本研究对水稻日本晴（Oryza sativa spp. japonica cv. Nipponbare）苗期叶片进行不同时间48 ℃高温处理，通过qRT-PCR法分析8个miR396家族成员以及12个预测的靶基因生长调节因子（growth regulating factor, GRF）家族的表达情况。结果显示，miR396家族8个成员及12个预测靶基因对高温胁迫应答不同。miR396a、miR396e和miR396f在每个时间的高温胁迫呈上升表达，而miR396b，miR396c，miR396d,miR396g,miR396h在1.5、3、6 h呈下降表达，在12、24 h呈不同程度上升表达；miR396a、miR396e和miR396f在高温胁迫下上升表达10倍以上，其中miR396f上升100倍以上。OsGRF家族随高温胁迫呈不规律的上升或下降表达，其中OsGRF2随着胁迫时间增加持续下降表达至8～10倍。并且OsGRF2与miR396a、miR396e和miR396f的表达呈高的负相关，表明OsGRF2为miR396a、miR396e和miR396f的靶基因。研究结果表明miR396在水稻耐高温方面有关键作用。
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