作者：杨磊; 宋丽爽; 刘雪霏; 白力格; 李光鹏utxjmjd3体外转录显微注射卵母细胞
摘要：UTX（ubiquitously transcribed tetratricopeptide repeat X chromosome）和JMJD3（jumonji domain containing 3）是组蛋白H3赖氨酸27位三甲基化（histone H3 lysine 27 trimethylation,H3K27me3）去甲基化酶,可以调控动物机体生长、肌肉发育、调节代谢等重要生理功能。本研究根据小鼠（Mus musculus）UTX和JMJD3 m RNA序列设计3对引物,分别构建了体外转录载体p MD19T-T7UTX和p MD19T-T7JMJD3。分别将体外转录m RNA注射进小鼠卵母细胞,并利用免疫荧光方法对H3K27me3进行检测。转录产物经电泳检测,结果显示,UTX与JMJD3条带清晰与预期大小相符;通过显微注射m RNA的卵母细胞,其H3K27三甲基化修饰明显减少。本研究成功构建了UTX与JMJD3体外转录载体,并在细胞水平证明转录产物能够翻译出具有活性的酶,为利用此载体研究UTX与JMJD3在生长发育及相关疾病发生中的机制提供基础资料。
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