作者：张冬辉 郑雪莉 李昊 周智敏 吴景龙 隋丹...中华鼢鼠真核表达免疫不育蛋白免疫印迹
摘要：卵透明带3 （zona pellucida 3,ZP3）蛋白是精卵结合最重要的受体.为了构建中华鼢鼠（Myospalax ontanierii）卵透明带3（mZP3）基因真核表达载体,本研究利用PCR方法得到加入酶切位点的mZP3片段,并将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1上,体外转染中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary cell,CHO cell）和尾静脉注射昆明小鼠（Mus musculus）体内,利用RT-PCR和Western bolt技术检测其表达情况.双酶切和基因测序鉴定结果表明,所构建的表达载体是pEGFP-mZP3;倒置显微镜观察到发绿色荧光的成功转染的细胞;RT-PCR和Western bolt检测结果表明,目的基因mZP3在CHO细胞中成功表达,并且小鼠肝脏内也检测到目的基因.研究结果表明,卵透明带3基因能够在CHO真核细胞内表达,为后期基因疫苗防治中华鼢鼠提供依据.
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