作者：陈健伟; 国晓瞳; 赵园; 丛霞; 王新; 姜忠...
摘要：灯盏花乙素（scutellarin,Scu）具有清热解毒、扩张心脑血管、改善微循环等作用.通过观察不同浓度Scu对猪肾小管上皮细胞（pig kidney proximal tubular,LLC-PK1）热休克蛋白72（heat shock protein 72,HSP72）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（B-cellymphoma/leukemia-2,Bcl-2）及Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2associated X protein,Bax）表达的影响,探讨灯盏花乙素提高细胞耐热性的可能机制.将培养的LLC-PK1细胞随机分为37℃空白对照（Ⅰ组）,42℃单纯热应激1 h（Ⅱ组）,以及分别用不同浓度（1×10-5、1×10-6和1×10-7 mol/L）Scu处理并42℃热应激lh组（分别为Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组）,提取各组细胞总RNA和总蛋白,用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测HSP72、Bcl-2和Bax基因及蛋白的表达量.结果显示,与Ⅰ组相比,Ⅱ组LLC-PK1细胞HSP72和Bax的mRNA及蛋白表达量显著升高（P＜0.05）,Bcl-2/Bax mRNA和蛋白比值显著降低（P＜0.05）,Bcl-2 mRNA和蛋白表达量并无显著差异（P＞0.05）.与Ⅱ组相比,Ⅳ和Ⅴ组LLC-PK1细胞HSP72 mRNA和蛋白的表达量均显著升高（P＜0.05）,Ⅲ组无显著差异（P＞0.05）;Ⅳ组细胞Bcl-2 mRNA和蛋白表达量均显著升高（P＜0.05）,Ⅲ和Ⅳ组并无显著差异（P＞0.05）;Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组Bax mRNA和蛋白表达量均显著降低（P＜0.05）;Ⅳ和Ⅴ组Bcl-2/Bax蛋白比值显著升高（P＜0.05）.研究结果表明,热应激条件下Scu可诱导LLC-PK1细胞HSP72表达,提高Bcl-2/Bax比值.结果提示,Scu可增强细胞的抗热休克作用.本研究丰富了体外培养细胞热应激反应的理论,为在实践中增加细胞抗热休克能力提供了理论依据.
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