作者：魏岁军; 邓力华; 肖国樱转基因水稻抗除草剂旁侧序列事件特异性检测基因型鉴定
摘要：随着越来越多的转基因作物及其产品进入人类生活的各个领域，准确、快速、高效的检测转基因作物及其产品成为转基因研究和安全管理的基本要求。为了建立抗两种除草剂转基因水稻（Oryza sativa）EB7001S的事件特异性检测方法，本研究利用高效热不对称PCR（high efficient thermal asymmetric interlaced PCR, hiTAIL-PCR）和长距离PCR法（long-distance PCR, LD-PCR）扩增获得了转基因水稻EB7001S中外源基因插入位点的旁侧序列，其中：右旁侧序列1 515 bp，左旁侧序列1 460 bp，外源基因插入水稻基因组第7号染色体第1 470 725位。以左右旁侧序列为基础，建立了转基因水稻EB7001S的事件特异性定性PCR检测方法，采用该方法可从转基因水稻EB7001S中扩增到458和629 bp的2条特异性目的片段。该方法特异性强、稳定性好、灵敏度高，在模板中掺入EB7001S基因组DNA的量为0.1%时仍能通过普通PCR方法检测出来。以旁侧序列为基础，还建立了能快速、准确鉴定外源基因纯合株系的三引物PCR检测法。这些检测方法的建立，将为转基因水稻EB7001S的利用和检测提供关键技术基础。
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