作者:朱鹏宇(编译)pcr技术基因组步移连接接头未知序列随机引物特异性扩增连接介导
摘要:基因组步移技术是PCR技术的一种应用,这种技术可以通过已知序列获得其相邻的未知序列。为了实现基因组步移的目的,目前已经开发了多种方法,其中包括反向PCR(inverse PCR,I-PCR)、连接介导PCR(ligation-mediated PCR,LM—PCR)、随机引物PCR(randomly primed PCR,RP—PER)等,目前基因组步移技术受到多个方面的限制,如I-PCR与LM—PCR会受到内切酶选择的限制;RP-PCR的方法虽然不需要对基因组进行前期的破碎处理,但会受到引物3’末端的3-6个碱基的影响而产生非特异性扩增等,进一步阻碍了基因组步移技术的发展,限制了其应用。
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