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香鱼雌核发育几种诱导方法的效果及子代的SSR、SRAP遗传标记分析

作者:王成义; 闫茂仓; 李明云; 王金华; 单乐州...香鱼雌核发育诱导

摘要:为研究不同诱导方法对香鱼(Plecoglossus altivelis)人工雌核发育的影响,本研究采用紫外线灭活同源精子刺激卵子发育、冷刺激法、热刺激法和静水压法抑制受精卵第二极体排出诱导香鱼雌核发育,并采用微卫星(SSR)标记和相关序列扩增多态性(SRAP)标记分析了雌核发育子代样本的遗传特征.结果表明,香鱼雌核发育冷刺激组受精率、发眼率和孵化率分别为(39.6±2.5)%、(25.3±3.5)%和(6.7±1.2)%;热刺激组受精率、发眼率和孵化率分别为(61.0±2.0)%、(34.7±2.1)%和(11.0±2.0)%;静水压组受精卵、发眼率和孵化率分别为(80.3±2.1)%、(66.3±1.5)%和(57.0±2.0)%,诱导方法以静水压法最佳,孵化率显著高于冷刺激组和热刺激组(P<0.01),15日龄子代存活率为(15.2±8.2)%,而冷刺激组存活率低于1%,热刺激组未发现存活个体.SSR标记分析表明,静水压法可以通过抑制第二极体排出诱导香鱼雌核发育,受检测的16尾子代标本有14尾未出现父本条带,15日龄鱼苗雌核发育比例达87.5%.雌核发育子代在Pag-003位点均为纯合子,但着丝点与Pag-051和Pag-076位点之间的重组率分别为28.6%和93.3%.SRAP标记K-group引物组合在母本中扩增出5条带,其中母本特有条带4条,父本中扩增出4条清晰带,其中父本特有条带3条.母本特有条带a4在14尾雌核发育子代标本中出现的比例(显隐性比)为l∶1(P=l.000),条带al、a3和a5在后代中的显隐性比例基本符合孟德尔定律(1.33∶1)(P=0.705); SRAP标记P-group引物组合在母本中仅能扩增出1条带,无母本特异条带,父本中扩增出8条带,父本特有条带7条.No.7和No.14标本检测到父本特有条带,属于精子灭活不完全鱼苗(12.5%).与微卫星标记相比,SRAP标记可通过一次反应可同时实现对香鱼基因组多个位点检测,获得更多的遗传信息.本研究数据显示�

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农业生物技术学报

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