作者：颜彦; 林拥军水稻启动子组织特异表达gus报告基因缺失分析
摘要：目前在基因工程中应用最广的为组成型启动子，但是组成型启动子驱动外源基因在各组织中持续恒定的表达可能引起植物发育迟缓等问题，因此克隆来源于作物本身的组织特异型启动子逐渐受到重视。根据本实验室基因芯片数据库找到一个在水稻绿色组织特异表达的基因（TIGRLocus：LOCOs06g211lo），用PCR技术从水稻明恢63（OryzasativaLssp．indica）基因组中克隆得到其上游启动子命名为GSP（green—tissuespecificpromoter），长度为1951bp。将GSP与带~fl-glucuronidas∞us）报告基因的的植物表达载体连接，经农杆菌（Agrobacterium）介导转化水稻中花11（D．sativaLssp．japonica）成熟种子胚诱导的愈伤组织，获得转基因水稻阳性植株，通过组织化学染色法证明，GSP是一个叶鞘和叶片特异表达启动子。对其进行5’端缺失分析，构建了7个缺失载体，通过验证缺失载体的表达谱，证明592bp长度的启动子就足以维持鞘叶特异表达模式，初步鉴定出了该启动子的核心功能区域。本研究所克隆出的GSP启动子是一个未曾报道过的鞘叶特异表达启动子，基因工程中利用此类启动子可以在改良水稻性状的同时减少对水稻生理方面的副作用，有良好的应用价值。
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