作者：索佳佳; 张保珍; 孙春玲; 王占美; 张双; ...小鼠胚胎钙调蛋白热休克蛋白70热休克转录因子1
摘要：体外培养的奶牛，绵羊和小鼠的附植前胚胎在热应激条件下能够合成热休克蛋白70以增强胚胎的耐热性保护其不受热损伤。而钙调蛋白（CaM）是细胞内最重要的Ca2＋受体蛋白并参与细胞活动中重要基因的转录活动。本实验旨在研究CaM参与小鼠（Mus muscttlus）胚胎热应激诱导型热休克蛋白70（HSP70）的表达，且明确CaM参与HSP70表达的具体途径。将发育至早期囊胚的胚胎分成空白对照（37℃）组、W7处理非热应激（370C＋W7）组、热应激（39℃）组和W7处理热应激（39℃＋w7）组。提取总RNA并分别检测HSP70、如M和热休克转录因子1（HSF1）mRNA表达；提取胞浆蛋白用Western blot技术检测HSP70、CaM和HSF1表达；用免疫共沉淀法检测HSP70-CaM和HSP70-HSF1复合物。结果发现，W7能显著抑制39℃热应激1h小鼠胚胎HSP70mRNA和蛋白的表达（P〈0．05）；W7对其他各组胚胎HSF1，mRNA表达的影响不显著（P〉0．05），但能显著降低39℃热应激1h小鼠胚胎HSF1蛋白表达（P〈0．05）；39℃热应激时，胚胎HSP70．CaM复合物增多，HSP70-HSF1复合物减少。本研究表明，小鼠胚胎受热应激时，CaM通过与HSP70竞争性结合，解离出HSF1，从而使HSP70大量表达。本研究揭示了CaM参与小鼠胚胎热激反应中HSP70表达的一种途径。可为研究胚胎耐热性以及热激信号转导提供基础资料。
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