作者：黄雪玲; 冯浩; 康振生内参基因小麦条锈菌小麦实时荧光定量pcrgenorm软件
摘要：选择合适的内参基因是利用实时荧光定量PCR准确分析基因相对表达量的先决条件。基于现有对内参基因的研究,本研究挑选出10个基因作为小麦条锈菌（Puccinia striiformis f.sp.tritici）的候选内参基因。经过PCR扩增效率筛选,8个基因符合要求可用于稳定度的筛选,这些基因包括泛素连接酶（UBC）、泛素连接酶E2（UBCE2）、核糖体蛋白S5（RPS5）、α微管蛋白（TUBA）、β肌动蛋白（ACTB）、β微管蛋白（TUBB）、延伸因子1（EF1）和延伸因子3（EF3）。本研究以两种小麦条锈菌（CYR32和Pst78）的夏孢子、萌发芽管分别接种两个小麦（Triticum aestivam）品种（CYR32/XZ9104和Pst78/AvS）后0.5、3和14d的样品为材料,利用实时荧光定量PCR技术,检测了这8个持家基因在不同发育阶段的小麦条锈菌中的表达情况。经geNorm软件分析发现,3个持家基因在样品中的表达趋势与小麦条锈菌的侵染过程相符合。ACTB、TUBB和TUBA的组合可作为检测小麦条锈菌基因表达的内参基因。
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