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棉铃虫核型多角体病毒orf27基因的表达和细胞内定位

作者:刘艳荷; 陈艳霞; 章亦卿; 徐海君; 张传溪棉铃虫核型多角体病毒orf27基因表达定位

摘要:棉铃虫核型多角体病毒(Helicoverpa armigera single nucleocapsid nucleopolyhedro virus,HaSNPV)orf27编码区全长768bp,编码255个氨基酸残基组成的多肽,预计分子量29.5kD。PCR扩增获得该基因,克隆到融合表达载体pGEX-4t-2中,表达GST-DRF27融合蛋白分子量55.5kD,表达量约占细菌总蛋白的9.2%。用纯化融合蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体。将该基因重组到杆状病毒表达载体Bacmid,并在粉蚊夜蛾(Trichopolusia ni)细胞Tn-5B1-4表达。表达蛋白的分子量为32kD,表达量约占细胞总蛋白的2.9%。将HaSNPVorf27在昆虫细胞中表达产物固定,免疫电镜法确定表达蛋白主要存在于细胞的细胞质中。

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农业生物技术学报

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