作者:郭志林; 王新庄; 张涌; 王木; 王轶敏; 胡...昆明小鼠原始生殖细胞胚胎生殖细胞胚胎干细胞生殖嵴
摘要:为提高昆明小鼠胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,EG cells)建系效率,以怀孕8.5~12.5d小鼠胎儿为材料,比较了胎儿后1/3部位的组织共培养、生殖嵴共培养、差速贴壁和穿刺生殖嵴4种分离胚胎原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)的方法以及不同传代方式对EG细胞克隆的影响。结果表明:生殖嵴共培养和差速贴壁方式获得了较好分离EG细胞的效果,与其它两组比较差异显著;手工传代方式与连同成纤维细胞一起消化的传代方式相比获得了较高传代比率。对所分离EG细胞经形态观察、AKP染色和体外分化能力检测,证实其符合小鼠EG细胞的集落状生长、细胞未分化特性及细胞多能性等特征。
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