作者：朱来华; 梁成珠; 陆承平; 吴华; 杨元杰; ...基因芯片杂交马疱疹病毒1型马动脉炎病毒马流感病毒马传染性贫血病毒东部马脑脊髓炎病毒
摘要：通过分子克隆技术获得马疱疹病毒1型（Equine herpesvirus 1,EHV1）、马动脉炎病毒（Equinearteritis virus,EAV）、马流感病毒（Equine influenza virus,EIV）、马传染性贫血病毒（Equine infectious anaemia virus,EIAV）和东部马脑脊髓炎病毒（East-ern equine encephalomyelitis virus,EEEV）等5种病毒各一段高度保守的特异性基因片段,用芯片点样仪逐点分配到处理过的玻片上,制备成检测芯片.提取样品中的RNA,进行反转录和荧光标记后滴加到芯片上进行特异性杂交,对杂交结果进行扫描检测和计算机软件分析.结果显示,制备的基因芯片可同时检测和鉴别上述5种病毒,可检测到阳性杂交信号的最高稀释度为10-6的病毒液,约25个病毒DNA拷贝,但其它病毒材料未见红色荧光信号,证明了本方法的特异性.在进口马的隔离检疫期间,采集马鼻肺炎、马动脉炎中和抗体阳性但病毒分离阴性马匹的白细胞悬液,分别在EHV1和EAV位点处可检测到阳性杂交信号.证明基因芯片技术不但快速、准确和敏感,而且可同时进行多种病毒的检测.
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