作者：郝炜; 王跃进; 王西平; 徐伟荣; 孙马中国野生葡萄芪合成酶原核表达包涵体复性多克隆抗体
摘要：根据中国野生葡萄芪合成酶基因cDNA序列（该序列已申请国家发明专利，申请号：200510041662．4），设计1对PCR引物，以野生种华东葡萄（Vitis pseudoreticulata）白河-35-15′RACEcDNA第一链为模板，克隆该目的基因。将该基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上，转化Escherichia coli BL21，经诱导后表达出约66kD的融合蛋白。该融合蛋白主要以包涵体形式表达，经变性剂溶解、梯度透析，对该包涵体进行复性，复性蛋白通过与Glutathione Sepharose 4B Fast Flow结合、洗脱，获得了纯化的芪合成酶融合蛋白。以洗涤纯化的包涵体作抗原免疫家兔，制备多克隆抗血清，经Western blot检测，该抗血清（稀释到1：3000）与芪合成酶融合蛋白识别反应良好。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
