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猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素apxⅡA基因的真核表达及其核酸疫苗

作者:贝为成; 严琳; 何启盖; 肖少波; 陈焕春猪传染性胸膜肺炎放线杆菌表达核酸疫苗免疫应答

摘要:利用PCR从自行分离鉴定的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneuromoniae,APP)血清7型菌株基因组DNA中扩增apxⅡA基因,构建了一个利用人类巨细胞病毒(Human cytomegalo virus,HCMV)启动子表达apxⅡA基因的真核表达质粒pCDapxⅡA,体外转染PK-15细胞,处理后的样品进行SDS-PAGE和Western blot分析,证实了免疫原性蛋白apxⅡA在细胞中表达.用表达质粒pCDapxⅡA作为核酸疫苗免疫BALB/c小鼠酶联免疫吸附试验,ELISA检测小鼠血清中特异性抗猪胸膜肺炎放线杆菌的抗体,结果第2次免疫后其抗体滴度都在1:128以上.初步证实,用apxⅡA作为核酸疫苗免疫动物可以激活机体产生免疫应答反应.

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农业生物技术学报

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