作者：王宇; 安晓荣; 柳青; 苟克勉转基因小鼠模型脱氢酶脂肪酸棉花southerncdna序列真核表达载体gfp基因多克隆位点pcr方法编码序列编码基因动物肌肉acid注射方法胚胎移植成年小鼠blot受精卵启动子线性化阳性质粒原核受体
摘要：以pEGFP-N1质粒为基础载体,切除gfp基因的编码序列后,在多克隆位点依次插入动物肌肉α-actin启动子和棉花ω-6脂肪酸脱氢酶编码基因fad2(fatty acid desaturase-2)的cDNA序列,构建成fad2cDNA真核表达载体.用显微注射方法,将线性化的载体DNA注入KM ×B6D2F1小鼠受精卵的的原核内部,然后将胚胎移植到输卵管内,13只受体怀孕产仔.合计移植了286枚受精卵,最后获得34只健康的成年小鼠,PCR方法检测确认5只为阳性小鼠,Southernblot证明只有1只阳性转基因小鼠.
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