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杆状病毒Sp1tMNPV gp41基因的克隆、表达及抗体制备

作者:潘丽晶; 李朝飞; 尹崇; 吕雷; 庞义gp41表达mnpv基因抗体制备克隆融合蛋白病毒粒子核衣壳杆状病毒

摘要:GP41是杆状病毒包埋型病毒粒子(Occlusion-derived virus,ODV)特有的糖蛋白,它介导芽殖型病毒粒子(Budded virus,BV)的核衣壳通过胞核。用PCR方法扩增得到斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedro virus,SpltMNPV)gp41基因,并将其克隆至5’端有6xHis编码序列的原核表达载体pQE30上,转化大肠杆菌(Escherichia coil)M15[pREP4],在1mmol/L异丙基-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导下超量表达了与理论预测值相符的1个37.9kD融合蛋白。以纯化的融合蛋白为抗原,免疫新西兰大白兔制备了特异的抗GP41抗体。Western印迹分析表明,该抗体适合进一步分析Sp1tMNPV GP41蛋白。

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农业生物技术学报

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