作者：曹翠丽; 阎蕴力; 杨春; 马常升; 石葛明; ...细胞体外培养nestin神经干细胞体外培养方法无血清培养基免疫细胞化学gfap培养细胞侧脑室前角单细胞悬液新生大鼠胰蛋白酶edta增殖能力倍增时间细胞贴壁诱导分化阳性细胞nse脑组织生长
摘要：目的:介绍一种较成熟的大鼠神经干细胞体外培养方法.方法:取新生大鼠(1d之内)侧脑室前角周围的脑组织,用EDTA:胰蛋白酶(1:1)消化,制成单细胞悬液,以2～5×105个细胞/ml接种于无血清培养基中.观察其增殖、分化情况,并用nestin、GFAP、NSE免疫细胞化学对细胞进行定性.结果:培养细胞呈悬浮生长,具有增殖能力,倍增时间为2d,nestin阳性.诱导分化后细胞贴壁生长,体积增大,并发出形态各异的突起.可见GFAP和NSE阳性细胞.结论:培养细胞经鉴定为神经干细胞.本方法简单、易操作,可行性强.
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