作者：徐清斌; 马萍; 贾绍斌; 刘晓方; 沙勇; 戴...骨骼肌细胞培养结蛋白
摘要：目的探讨骨骼肌卫星细胞的分离、培养及鉴定方法.方法从外科手术中获取患者骨骼肌3-5g,采用胶原酶和透明质酸酶消化的方法获取骨骼肌卫星细胞,进行体外培养、扩增,并观察所培养细胞的形态;降低培养液中胎牛血清浓度,观察肌管形成;免疫组化方法检测Desmin的表达;RT-PCR法检测肝细胞生长因子受体c-met的表达.结果卫星细胞在体外生长、增殖良好,刚分离出的卫星细胞呈球形,折光性强,12小时后开始贴壁,仍为圆形,48小时后贴壁完全,细胞呈梭形,生长缓慢.随时间延长,细胞增殖、迁移,逐渐有规律地平行排列.降低细胞培养液中胎牛血清浓度至2%,卫星细胞可融合成肌管,免疫组化显示培养的细胞Desmin阳性,这些细胞表达c-met.结论酶消化法适用于卫星细胞的培养.
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