作者：裴秀英; 郝方; 张雪莲结核分支杆菌克隆基因icl
摘要：目的研究克隆并表达结核分支杆菌H37Rv结构基因icl的最佳策略,并获得纯化蛋白.方法以M.tb H37Rv基因组为模板,扩增该菌株的异柠檬酸酶基因icl,并重组入pUC18质粒进行克隆,克隆基因进而重组入原核表达质粒pET28-a(+)中,在不同的条件下进行诱导表达.重组蛋白以Ni-NTA agarose亲和层析柱纯化.结果在25℃,0.25mM IPTG诱导表达8h可获得最佳表达量的可溶性重组蛋白,经HPLC和质谱检测分子质量为目标蛋白.结论本研究中所采用的icl基因克隆表达策略能够获得正确的高表达的可溶性异柠檬酸酶重组蛋白.
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
