作者：马玉珍; 张继英; 阿玫; 白雁; 扈廷茂乳腺特异表达增强因子细胞再生绵羊构建增强绿色荧光蛋白绿色荧光蛋白基因egfp基因胎儿成纤维细胞特异性表达载体转基因细胞基因组dna肝pcr技术greendna转染脂质体介导pcr检测显微镜观察
摘要：用PCR技术分别从人和绵羊基因组DNA中扩增人肝细胞再生增强因子(Human augmenter of liver regeneration,hALR)基因和绵羊β-乳球蛋白(sheep beta-lactoglobulin,BLG)基因启动区序列,从pEGFP-C1质粒中扩增增强绿色荧光蛋白(Enhanced Green fluorescence protein,EGFP)基因及其表达调控元件.由质粒p7zf(+)构建成ALR基因乳腺特异表达、EGFP基因非组织特异性表达载体.同时体外培养绵羊胎儿成纤维细胞(sheep fetal fibroblast cells,SFFCs),脂质体介导载体DNA转染SFFCs,激光共聚焦显微镜观察和PCR检测转基因细胞,结果表明,增强绿色荧光蛋白基因在SFFCs中表达,转基因细胞中可扩增出BLG、ALR、EGFP基因条带.
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