OGT结构改造对糖探针GlcNAz利用率的影响

作者：李玲; 刘丽; 刘晓燕; 白冰洋; 刘丕; 张连...ogt结构优化分子探针glcnaz

摘要：GlcNAz作为探针,可用于代谢标记细胞内O-GlcNAc修饰蛋白,帮助蛋白富集和后续质谱鉴定.但细胞内大量存在的天然糖供体(UDP-GlcNAc)会竞争结合OGT蛋白,从而降低GlcNAz利用效率.为了提高GlcNAz利用率,在分子对接基础上,对OGT进行结构改造,构建了两种sOGT突变体(M130A、Y470A)并测定了它们对UDP-GlcNAz的利用率.与野生型sOGT相比,两种突变体对UDP-GlcNAz的利用率(相对于UDPGlcNAc)均有显著提高,细胞内M130A对GlcNAz的利用率(相对于GlcNAc)提高了2.2倍.最终结果表明:M130A能显著提高细胞对探针GlcNAz的利用率,为大量鉴定细胞内O-GlcNAc修饰蛋白提供了新思路.

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