花椰菜（Brassica oleracea vat．botrytis）抗黑腐病差异表达cDN段的克隆及功能的初步研究

作者：古瑜; 毛英伟; 赵前程; 孙德岭; 刘惠静; ...oleracea黑腐病抗病相关基因片段

摘要：采用花椰菜抗黑腐病近等基因系C731（感病系）和C712（抗病系）作为材料，利用cDNA—AFLP技术，研究了花椰菜黑腐病抗性在黑腐病菌侵染和非侵染条件下基因表达的情况．获得了两个阳性克隆M2和M6．Northern杂交和点杂交进一步证明M2是组成型表达的cDN段，只是在病菌侵染与非侵染条件下表达丰度不同．而M6是差异表达的cDN段．Southern杂交表明M6 cDN段在花椰菜基因组中是单拷贝序列．随后的序列分析发现M6cDN段与拟南芥1号染色体的BACF19P19中66665～66813bp有84％同源性，该片段编码拟南芥的2A6蛋白的部分序列．推测的氨基酸序列与拟南芥的2A6蛋白部分序列有91％同源性．用H2O2作为外源分子胁迫处理的初步功能分析发现：M6cDN段受H2O2诱导，在诱导早期16～24h高度表达，其在叶片中的积累呈逐渐上升趋势．根据序列分析和初步的功能分析的结果推测：M6cDN段可能就是编码花椰菜中类2A6蛋白的部分基因片段．是参与花椰菜抗病反应信号途径的相关调控基因片段．

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