作者：林紫微; 杨菲; 黄天一; 陈婷婷; 崔杰; 李...芍药苷前成骨细胞凋亡foxo3a斑马鱼骨质疏松
摘要：目的研究芍药苷(PF)对前成骨细胞凋亡的影响及相关机制,通过斑马鱼骨质疏松模型验证其整体效应.方法体外培养前成骨细胞系MC3T3-E1细胞,采用地塞米松(DEX,1μmol/L)诱导细胞凋亡,观察PF的干预效应.采用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测抗凋亡蛋白Bcl-2和凋亡蛋白Bax的表达,免疫荧光检测FoxO3a的核易位情况.建立泼尼松龙(Pred,25μmol/L)诱导的斑马鱼骨质疏松模型,钙黄绿素染色观察PF对Pred干扰的斑马鱼骨骼面积的影响,qPCR检测破骨标志基因抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、组织蛋白酶K(CTSK)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)以及成骨细胞标志基因碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2a(Runx2a)、锌指转录因子7(Sp7)的mRNA变化.结果 PF可缓解DEX对MC3T3-E1的细胞活力的抑制作用,并显著降低细胞凋亡率;对凋亡相关蛋白的检测发现,PF显著促进Bcl-2的蛋白表达,升高Bcl-2/Bax的比率;进一步研究发现PF可显著抑制FoxO3a的入核.与Pred组相比,PF增加了斑马鱼第一椎骨的骨骼面积,抑制了TRAP、CTSK和MMP-9的基因表达,促进了ALP、Runx2a和Sp7的基因表达.结论 PF能够抑制前成骨细胞凋亡,改善斑马鱼骨质疏松,该作用可能与升高Bcl-2/Bax比率及抑制FoxO3a的核易位有关.
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