作者:张英 李卫东 迟春昕孕激素高迁移率组蛋白b1人脐静脉内皮细胞内毒素血症
摘要:目的观察孕激素对高迁移率组蛋白B1(HMGB1)诱导人脐静脉内皮细胞(HUNVEC)释放细胞因子白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法分离培养人原代HUVEC,克隆构建HMGB1原核重组表达载体pET14b-HMGBl;用不同浓度的原核表达纯化的HMGB1(0、10、100、500、1000ng/ml)蛋白和不同浓度的孕酮(0、0.1、1、10、100mmol/L)刺激HUVEC,24h后用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清中IL-6的表达水平;用500ng/ml的HMGB1分别与不同浓度的孕酮联合作用刺激培养的HUVEC,ELISA法检测细胞上清中IL-6的表达水平;分析孕酮对HMGB1诱导IL-6影响的剂量效应。结果不同浓度的HMGB1刺激HUVEC后发现,低浓度HMGB1可轻度下调IL-6的分泌表达,但无明显统计学差异(P〉0.05),一定浓度以上则可使IL-6水平明显升高(P〈0.01);不同浓度孕激素对HUVEC产生IL-6没有明显影响,但以剂量依赖方式抑制HMGB1对IL-6的分泌(P〈0.01)。结论HMGB1可诱导HUVEC释放炎性细胞因子IL-6,而孕激素以剂量依赖的方式抑制这些炎症因子的释放,这为孕激素在内毒素血症的发生发展中发挥保护作用提供了分子水平的理论基础。
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