作者：吴伟东 方驰华 杨正心 包佳巾rna干扰乳腺癌表皮生长因子受体小干扰rna成瘤率肿瘤抑制率
摘要：目的探讨采用体外化学合成的小干扰RNA（siRNA）结合阳离子脂质体是否能有效在体转染乳腺癌细胞，以期为RNAi的在体实验研究提供实验数据和理论依据。方法（1）建立裸鼠肿瘤动物模型，计算成瘤率。（2）体外转染乳腺癌细胞。常规动物接种，测量肿瘤体积和动物重量，计算肿瘤抑制率。（3）采用免疫组化和Western blotting技术测定肿瘤组织的表皮生长因子受体蛋白水平，采用Real—time PCR检测表皮生长因子受体基因水平，采用ELISA检测动物血清及肿瘤抽提蛋白中EGF含量。结果MDA-MB-231、ZR-75细胞成瘤率依次为30．00％、88．89％。MDA—MB-231细胞的成瘤能力明显弱于ZR-75细胞。ELISA检测结果证实dsRNA-表皮生长因子受体可将血清及肿瘤组织抽提蛋白中的EGF含量分别降低16．77％、12．59％。Real—time PCR结果表明dsRNA-表皮生长因子受体可将表皮生长因子受体基因表达下调21．05％。结论（1）采用体外化学合成的siRNA结合阳离子脂质体可有效在体转染乳腺癌细胞。（2）在体实验中RNAi效应持续的时间明显长于体外实验。（3）针对表皮生长因子受体基因序列设计的siRNA可作为极具开发前途的抗肿瘤新药。其在体实验中触发RNAi可能的作用机制尚需进一步深入探讨。
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