作者：孙晓敏; 郝文波; 李明; 罗仁; 贾钰华恶性疟原虫血型糖蛋白a噬菌体随机肽库
摘要：目的探索EBA-175与GPA之间的结合信息，为疟疾短肽疫苗及拮抗药物的研制奠定基础。方法以EBA-175重组蛋白为靶，采用亲和筛选法对噬菌体随机十二肽库进行3轮筛选，通过ELISA、竞争抑制试验、Dot-ELISA及Western blotting等方法鉴定获得的噬菌体短肽与EBA-175之间的结合特性。对阳性克隆进行DNA序列测定．推导其十二肽的氨基酸序列并与GPA氨基酸全序列进行了同源性比较。结果经3轮亲和筛选后，结合噬菌体得到良好富集。从第3轮洗脱液铺制的琼脂板中随机挑取30个噬菌体单克隆。ELISA检测有27个为阳性，阳性率达90％。竞争性ELISA显示多数阳性噬菌体能竞争抑制EBA-175与其单抗结合。DNA及氨基酸序列分析表明24个噬菌体展示十二肽中共有序列IRR与GPA的114-116位氨基酸同源。结论阳性噬菌体表达的短肽是EBA-175所识别的模拟表位，IRR几位氨基酸可能对EBA-175与GPA的结合起重要作用。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
