作者：刘倩; 江世贵; 邱丽华; 黄建华; 周发林; ...斑节对虾toll受体蛋白细胞免疫模型tlr信号通路微生物刺激先天性免疫
摘要：Toll受体蛋白（Toll receptors）是一类重要的模式识别受体,在无脊椎动物先天性免疫系统中发挥重要作用。文章对斑节对虾（Penaeus monodon）新型Toll9受体基因（Pm Toll9）进行了研究：以人源胚胎肾细胞（HEK293T）成功构建体外细胞免疫模型,通过免疫印迹方法证实Pm Toll9重组真核蛋白可在HEK293T中成功表达。双荧光素酶报告系统检测发现在200 ng转染浓度处Pm Toll9对NF-κB报告基因的激活效果显著。q RT-PCR数据证明PmToll9成功激活HEK293T细胞Toll-like receptor（TLR）信号通路,促进通路下游髓样分化因子（My D88）、肿瘤坏死因子（TNF-α）和白介素（IL-10）的上调表达,同时酶联免疫吸附测定结果证明Pm Toll9可促进TNF-α蛋白表达水平显著上调。斑节对虾体内细菌刺激实验结果显示无乳链球菌（Streptococcus agalactiae）可激活Pm Toll9在肝胰腺、肠、淋巴和鳃中的表达,哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）可显著抑制Pm Toll9在肝胰腺中的表达。提示无乳链球菌可通过Pm Toll9激活Toll信号通路,引起机体免疫防御反应,而哈维氏弧菌对此过程具有一定的抑制作用。
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