作者：陈劲松; 江世贵; 黄建华; 杨其彬; 马振华...斑节对虾天门冬氨酸转氨酶氨氮胁迫基因克隆组织表达
摘要：为了探索天门冬氨酸转氨酶（AST）在斑节对虾（Penaeus monodon）氨氮（NH3-N）解毒代谢中的作用，该研究利用RACE技术获得了斑节对虾AST基因（PmAST）的cDNA全长序列，进行了相关生物信息学分析，在此基础上采用荧光定量与氨氮胁迫实验的方法研究了PmAST基因在斑节对虾的不同组织以及不同浓度氨氮胁迫过程中差异表达情况。该序列全长1957bp，开放阅读框（ORF）为1242bp，3’非编码区（UTR）为584bp，包括含有30个碱基的poly（A）尾，5’非编码区（UTR）为131bp。ORF可编码413个氨基酸，预测分子量为45．852kD，理论等电点为8．85。序列含有1个AAT—like超家族结构域、15个磷酸化位点和2个糖基化位点。PmAST的mRNA在斑节对虾各组织中都有表达，在肝胰腺中表达量最高，其次为鳃组织，在胃和脑组织中的表达量最低。96h氨氮胁迫后荧光定量PCR分析结果表明，PmAST在肝胰腺和鳃组织中都具有不同程度的表达上调，显著高于对照组（P〈0．05）。研究结果表明斑节对虾的PmAST基因在氨氮胁迫条件下会出现表达上调，并且氨氮浓度越高其上调幅度也越大，所以PmAST参与了斑节对虾的急性氨氮胁迫应答。
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