作者:李向群; 刘君炎; 刘焰; 居薇; 刘斌波; 李...结核分枝杆菌
摘要:目的构建表达结核杆菌热休克蛋白65(HsP65)的“自杀性”DNA疫苗。方法用聚合酶链反应,从我室构建的表达结核杆菌HSP65真核表达质粒中(pCHSP65),扩增出编码HSP65的基因,与“自杀性”DNA载体pSFV重组。经酶切、测序鉴定,间接免疫荧光(Ⅲ)证实其能表达HSP65后,将此“自杀性”DNA疫苗(pAHSP65)免疫小鼠。用ELISA、MTT法研究其免疫效应,并观察其对结核菌感染小鼠的保护作用。结果酶切、测序鉴定结果证实为结核杆菌HSP65基因,在BHK21细胞中经IF证实有HSP65表达。该疫苗接种能诱导小鼠产生特异性抗体,刺激淋巴细胞增殖,并能抵抗结核杆菌的感染。结论我们成功地构建了表达结核杆菌HSP65的“自杀性”DNA疫苗,该疫苗能诱导特异性免疫应答,并对结核菌感染的小鼠有保护作用。其免疫效应优于常规的HSP65DNA疫苗。
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