作者：韩岳; 王希良; 何凤田; 摆茹; 董梅; 赵光...鼠疫杆菌f1抗原v抗原dna疫苗免疫应答
摘要：目的获得鼠疫F1和V抗原的重组质粒pVAX1/F1和pVAX1/V,并比较其诱导的特异性免疫应答的能力.方法 PCR扩增鼠疫菌F1和V编码基因,分别与pGEM-T连接测序,构建pVAX1/F1和pVAX1/V重组质粒,转染COS-7细胞.用细胞免疫化学方法鉴定目的蛋白的表达,重组质粒加GM-CSF免疫Balb/c小鼠,观察免疫效果.结果F1和V均在COS-7细胞中表达;免疫鼠体内产生特异性抗体,pVAX1/V所诱导的抗体水平比pVAX1/F1高;通过抗体亚型分析、细胞因子和CD分子等指标的测定表明所构建DNA疫苗以诱发Th1型免疫为主.结论成功构建重组真核表达质粒pVAX1/F1和pVAX1/V,并且均具有诱导特异性细胞免疫和体液免疫应答的能力,为鼠疫菌新型疫苗研制奠定了基础.
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