作者：张丽; 高美华cd59真核基因表达中国仓鼠卵巢细胞糖化补体
摘要：目的构建突变人CD59的真核表达系统,检测突变人CD59蛋白糖化前后抗补体活性,探讨CD59在糖尿病血管并发症病理机制中的重要作用,为人类糖尿病血管增殖症的发病机理提供依据.方法应用阳离子脂质体法将含有突变人CD59的重组pALTER质粒与pCDNA共转染人CHO细胞;G418筛选出阳性克隆,流式细胞术进一步筛选出高表达克隆;免疫组化、免疫荧光、Western-blot、ELISA验证CD59的表达;BCECF释放试验研究糖化前后突变人CD59抗补体活性.结果成功构建突变人CD59的真核细胞表达系统;糖化后较糖化前突变人CD59转染CHO细胞BCECF释放率明显升高.结论高糖使CD59活性下降,可能导致或加速糖尿病血管并发症的发生.
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