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重组人ALR单克隆抗体的制备、鉴定和初步应用

作者:王彦芳; 焦艳晴; 董爱华; 耿娅; 贾茜肝再生增强因子基因重组人alr的二聚体单克隆抗体夹心elisaalr的组织定位

摘要:目的 制备抗重组人肝再生增强因子(ALR)的单克隆抗体(McAb)。方法 以基因重组人ALR二聚体(drhALR)为抗原,免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体。用常规法制备抗ALR单体(mrhALR)多抗,建立夹心ELISA法测定ALR,初步确定ALR在小鼠组织的分布;用荧光免疫方法对胎鼠各组织进行ALR检测。结果 筛选出3株稳定分泌抗drhALR的单抗杂交瘤细胞株,免疫球蛋白亚类分别为IgG1、IgG2a、IgG2b,特异性高,用于rhALR的免疫印迹及ELISA检测,可同时识别rhALR单体(mrhALR)和二聚体(drhALR);夹心ELISA法检测小鼠肝、肾、脾提取液ALR含量与鼠龄无关,各脏器的ALR含量不同,分别为肝0.36μg/g,肾0.11μg/g,脾0.05μg/g;免疫荧光检测胎鼠,各器官有不同程度ALR的存在,无器官特异性。结论 用drhALR为抗原制备的抗rhALR单克隆抗体,能够用于ALR的体内外免疫学检测,为rhALR及生化提取ALR的药理学研究及质量标准奠定了基础。

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免疫学

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