作者：张旭; 王桂英; 朱建锋; 郑克举; 王进茂转双抗虫基因741杨原生质体游离纯化
摘要：以转双抗虫基因741杨无菌苗叶片为材料，对叶片原生质体游离、纯化方法及影响因素等进行了分析研究。结果表明，上部叶片产量和活力均高于其他叶位，在实验的浓度范围之内，MacerozymeR-10（离析酶）、CellulaseOnozukaR-10（纤维素酶）、Driselase（Sigma）（崩溃酶）对原生质体的产量和活力无显著影响。适宜转双抗虫基因741杨叶片原生质体游离与纯化的条件为无菌苗上部叶片为材料，0．7mol／L甘露醇的CPW盐溶液预质壁分离1～1．5hCPW＋0．5％MacerozymeR-10＋0．25％CellulaseOnozukaR-10＋0．025％Driselase（Sigma）＋0．5mol／L甘露醇（pH5．7），酶解温度27℃，酶解时间10h，用“过滤-离心-漂浮法”纯化原生质体。
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