作者：马向超; 黄大庄; 张爽; 任志彬桑天牛pcr反应体系正交组合单因素
摘要：建立一整套适用于研究桑天牛线粒体细胞色素氧化酶I（mtDNA CO I）基因的PCR反应体系,研究不同地理分布的桑天牛遗传多样性。通过L16（4^5）正交组合试验和单因素梯度试验对缓冲液（Mg^2＋）、dNTP、随机引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA的浓度和退火温度、循环次数等影响PCR扩增的重要因素进行优化。试验结果表明,50μL反应体系及反应程序中各因素优化组合为：缓冲液（含Mg^2＋）0.9mmol/L,dNTP 0.15mmol/L,随机引物0.44μnol/L,TaqDNA聚合酶3.0U,模板DNA75ng;退火温度47℃,循环次数35次。
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