作者:周鹏; 林玮; 周祥斌; 陈晓阳刨花润楠体系优化
摘要:以刨花润楠(Machilus pauhoi)1.5 a生小苗幼嫩叶片为试材,对影响刨花润楠SRAP-PCR扩增的模板DNA量、引物、dNTP和Mg^2+体积摩尔浓度、Taq DNA聚合酶、退火温度6个主要因素进行优化。结果表明,SRAP-PCR的最佳反应体系为:25μL的SRAP-PCR反应体系中,2.5μL 10×PCR buffer、模板DNA量60 ng、Mg^2+2.0 mmol/L、d NTP 0.225 mmol/L、引物0.3μmol/L和Taq DNA聚合酶1.25 U。对优化的反应体系和扩增程序的验证结果表明,优化的刨花润楠SRAP-PCR反应体系和扩增程序是稳定可行的。
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