作者：李义良; 赵奋成; 李宪政; 陈铭甄; 钟岁英...湿加松msapdna甲基化引物筛选
摘要：为开展湿加松（Pinus elliottii×P.caribaea）甲基化研究，以湿加松幼嫩针叶为材料，建立了湿加松MSAP（甲基化敏感扩增多态性）反应体系，其中：酶切-连接体系为：400ng基因组DNA用EcoRⅠ＋HapⅡ或EcoRⅠ＋MspⅠ各3U进行双酶切，37℃保温24h，用T4DNAligase16℃连接过夜。最佳预扩增体系为：酶切-连接产物1μL、上下游引物各1μL、2×PCRmastermix10μL和ddH2O27μL。20此选择性扩增体系中，含有10倍稀释的模板DNA2μL、上下游引物各1μL、2×PCRmastermix10μL和ddH2O26μL。利用反应体系，筛选出了13对适宜于湿加松MSAP分析的引物，建立的MSAP反应体系可用于湿加松基因组DNA甲基化差异分析。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
