作者：许建秀; 吴小芹; 叶建仁; 朱丽华; 吴静赤松松材线虫胚性愈伤组织体细胞胚成熟萌发
摘要：【目的】研究脱落酸、PEG、肌醇、碳源、凝固剂及培养方式等对抗松材线虫病赤松体细胞胚发育及成熟萌发的影响。【方法】通过对抗松材线虫病赤松种质资源库的调查与分析,选用诱导和增殖状态良好的抗松材线虫病赤松无性系22#-1和13#-1为供试材料,通过不同培养条件的对比试验,筛选出最优的抗病赤松体细胞胚发育及成熟萌发条件。采用SPSS17.0等软件对体细胞胚进行统计分析。【结果】添加15 mg·L~（-1）ABA和140 g·L~（-1）PEG8000的LP培养基上,正常体细胞胚数达到171个·g~（-1）,高于其他处理;在渗透剂方面,肌醇的浓度为8.0g·L~（-1）时,抗病赤松的正常体细胞胚数最多,达到179个·g~（-1）,胚性愈伤组织直接放置于添加了肌醇的成熟培养基中,没有在中间过渡培养基中培养,因此可以缩短2~3周培养时间,在8周前后就形成了成熟的子叶胚;在碳源方面,添加60 g·L~（-1）麦芽糖的LP培养基上,正常的体细胞胚数达到235个·g~（-1）,高于其他处理;在凝固剂方面,植物凝胶浓度为3.0 g·L~（-1）时,培养基凝固,软硬适中,产生的子叶胚生长良好,而培养基中添加了聚乙二醇（PEG）,凝固剂琼脂从6.0 g·L~（-1）添加至12.0 g·L~（-1）时,培养基均不能凝固,愈伤组织无法生长,也无子叶胚形成;在培养方式方面,采用液-固增殖-固成熟方式培养时,胚性愈伤组织经11~12周发育为成熟体细胞胚,其中22#-1的正常体细胞胚数最多达到239个·g~（-1）,高于其他处理;在体细胞胚萌发培养基上产生的体细胞胚的萌发率和植株转化率分别为67.2%和46.5%,再生植株移栽3个月后成活率为32.7%。【结论】将抗松材线虫病赤松胚性愈伤组织置于15.0 mg·L~（-1）ABA、140 g·L~（-1）PEG8000、8.0 g·L~（-1）肌醇、60 g·L~（-1）麦芽糖、3.0 g·L~（-1）植物凝胶的LP培养基上,以液-固增殖-固成熟培养方式培养,成功获得了正�
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