作者:于瑞凤; 朱建军膜片箝膜电位大麦根木质部薄壁细胞
摘要:为了解细胞膜氢离子泵的电生理特性,本实验用膜片箝法研究了大麦根木质部薄壁细胞质膜上的生电泵在无一价阳离子条件下的生电活性与阴离子通道电导性的关系.结果显示:在大约40%的所测定的原生质体中观察到了由离子泵活动导致的膜电位超极化;添加H+泵激活剂壳梭孢菌素导致在零电位的越膜电流密度的增加和膜电位大约-50V的超极化;相比之下,添加H+泵抑制剂DCCD(Dicylohexylcarbondiimid)则导致膜电位的去极化作用和零电位越膜电流密度的减少;没有观察到钙离子通道抑制剂赤藓红B对生电泵活性的作用;细胞外溶液的pH值从5.8升高到8.8时,由于氢离子浓度梯度的加大导致泵的激活.这些特征都表明所测到的生电泵活性是H+泵的作用而不是Ca2+泵.负离子通道抑制剂DIDS(4,4’-Diisothiocyano-2,2’-stilbenedisulfonic acid)能导致膜电位的强烈超极化,暗示负离子通道的活性导致的短路效应强烈干扰和影响了H’泵的电活性的测定.这可能是植物根木质部细胞质膜上的H+泵的电活性用膜片箝法难以检测的原因.尽管非特异性Ca2+通道抑制剂La3+也对泵的活性有明显影响,但在添加DIDS后添加的钙离子通道抑制剂nifidepin没有显示出对泵活性的影响,表明钙离子泵的活性在钳制的原生质体膜的膜片上几乎看不到.
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