作者：孔祥玲 佘野 葛红雨 吴维光二乙基己基邻苯二甲酸睾丸支持细胞紧密连接基因表达
摘要：目的探讨邻苯二甲酸二乙基己酯（di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP）体外对大鼠睾丸支持细胞紧密连接的作用以及相关基因表达的影响。方法体外分离和原代培养大鼠睾丸支持细胞,建立支持细胞原代双室培养模型,以只加入二甲基亚砜（DMSO）的细胞孔作为对照,以10、50、100 nmol/L浓度的DEHP（DEHP低、中、高剂量组）染毒24 h。应用跨上皮电阻测定法检测单层细胞两侧跨上皮细胞电阻值（TER）,荧光定量聚合酶链反应（PCR）法检测支持细胞闭锁蛋白（Occludin）、闭锁小带蛋白1（Zonula occluden-1,ZO-1）、紧密连接蛋白11（Claudin 11）基因mRNA表达,应用Weastern blot检测支持细胞Occludin、ZO-1、Claudin 11蛋白的表达。结果与对照组比较,不同浓度的DEHP各组细胞TER值均降低。同时大鼠睾丸支持细胞Occludin、ZO-1、Claudin 11基因mRNA表达随DEHP浓度增加而降低（P〈0.05）,Occludin、ZO-1、Claudin 11蛋白表达也随DEHP浓度增加而降低（P〈0.05）。结论 DEHP可通过下调Occludin、ZO-1、Claudin 11基因表达而影响大鼠睾丸支持细胞的紧密连接,进而影响支持细胞的功能。
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