作者:危志强; 李海涛; 曹娟; 印获; 周长菊; 赵...二十碳四烯酸白蛋白人近端肾小管上皮细胞转分化
摘要:目的探讨二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)对人白蛋白诱导的人近端肾小管上皮细胞(HK-2)发生转分化的干预作用。方法体外培养人HK-2细胞,随机分为6组:A组,空白对照组(未加任何刺激物);B组,单纯EPA组(加入30μmol/LEPA);C组,血白蛋白(albumin,Alb)诱导组(加入5mg/mlAlb);D组,低剂量EPA干预组(5mg/mlAlb+10μmol/LEPA);E组,中剂量EPA干预组(5mg/mlAlb+30μmol/LEPA);F组,高剂量EPA干预组(5rag/m1Alb+50μmol/LEPA)。细胞免疫荧光检测E钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle ac-tin,a-SMA)的表达;ELISA法检测纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的水平;采用RT-PCR检测转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)的mRNA表达。结果与A组比较,B组TGF-β1 mRNA、α-SMA、FN、E-cadherin表达均无统计学差异(P〉0.05);C组TGF-β1mRNA、α-SMA、FN较其他各组表达明显增高(P〈0.05),而E-cadherin表达明显下降(P〈0.05)。与C组比较,D组、E组、F组TGF-β1 mRNA、盯SMA、FN表达逐渐下降,两组间比较差异有统计学意义(P〈0.05);E-cadherin的表达逐渐增高,各组间比较差异有统计学意义(P〈0.05)。提示EPA可显著抑制Alb刺激人肾小管上皮细胞表达E-cadherin、mSMA,同时下调上清液中FN水平,且其抑制作用的强弱与EPA浓度密切相关。EPA还明显下调了A1b刺激后TGF-β1的表达。结论 一定浓度的人白蛋白可以诱导体外培养的HK-2细胞发生转分化;EPA可一定程度上抑制白蛋白诱导HK-2发生转分化过程,且呈剂量依赖性。
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