作者:何国平; 刘雨生; 童先宏; 郑圣霞; 张荣; ...密度梯度离心胎儿有核红细胞keihuaer抗酸染色胎儿血红蛋白
摘要:目的探索建立一种简便、快速、较低成本的用于孕妇外周血胎儿有核红细胞(FNRBC)富集的实验方法。方法采集18名孕周在8~16周的孕妇外周血10ml,经Percoll不连续密度梯度离心初步分离后,运用Keihuaer抗酸染色法对玻片上的细胞进行染色标记,显微镜下观察、辨别FNRBC的特殊染色及形态,对阳性涂片者进一步行胎儿血红蛋白(HBF)特异性抗体标记以证实其胎源性。结果经Keihuaer抗酸染色处理,阳性FNRBC的胞浆染色呈深红色,核蓝色,而母亲的有核红细胞胞浆不着色。18名孕妇外周血中有14名可检出FNRBC,平均1~6个阳性FNRBC/病例,阳性检出率为77.8%。14例FNRBC阳性玻片经HBF抗体标记亦证实相同结果,而4例Keihuaer抗酸染色阴性病例亦表现HBF标记阴性,两者检出符合率100.0%。结论密度梯度离心结合Keihuaer抗酸染色法用于富集FNRBC具有较高的特异性,实验操作方法简便、快速,有望用于无创性产前基因诊断的推广应用。
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